UV分光光度計的不同測量模式選擇
UV分光光度計可根據(jù)實驗需求來選擇測試模式,儀器提供的測試模式有“波長掃描”、“時間掃描”、“定點測量”、“定量測量”、“核酸測量”和“蛋白質(zhì)測量”幾種,我們依次來看看:
一、波長掃描
主要用以檢測樣品對一定范圍波長光的吸收情況,以便對樣品進行定性測量。
1.點擊左側(cè)主功能欄中的“波長掃描”即可進入波長掃描界面。
2.根據(jù)實驗要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測光路同時放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點擊“基線測量”以扣除空白的背景吸收。
5.將檢測光路中的空白溶液換成待測樣品。
6.點擊“掃描”。以完成樣品波長掃描檢測。
7.點擊“保存”并選擇保存路徑即可保存譜圖。
注意:在“基線測量”中所選擇的基線必須與參數(shù)設(shè)置中基線一致!
二、時間掃描
是檢測樣品在特定波長范圍內(nèi)吸光度(或透過率)隨時間的推移而發(fā)生變化情況,主要用以檢測樣品的穩(wěn)定性或進行化學(xué)動力學(xué)研究。
1.點擊左側(cè)主功能欄中的“定量測量”即可進入定量測量界面。
2.根據(jù)實驗要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測光路同時放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點擊“基線測量”以后扣除樣品空白的背景吸收。
5.將檢測光路中的空白溶液換成待測樣品。
6.點擊“掃描”以完成樣品波長掃描檢測。
7.點擊“保存”并選擇保存路徑即可保存譜圖。
三、定點測量
是檢測樣品在特定波長中的吸光度(或透過率)。
1.點擊左側(cè)主功能欄中的“定量測量”即可進入定量測量界面。
2.根據(jù)實驗要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測光路同時放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點擊“自動校零”,以扣除該波長中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測光路中的空白溶液換成待測樣品。
6.點擊“測量”,以完成樣品的吸光度(或透過率)的測量。
7.點擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測量結(jié)果。
四、定量測量
可通過檢測標準樣品或輸入特定的系數(shù)建立標準曲線后測量樣品的濃度值。
1.點擊左側(cè)主功能欄中的“定量測量”即可進入定量測量界面。
2.根據(jù)實驗要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測參數(shù)并輸入標樣的濃度值。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測光路同時放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點擊“自動校零”,以扣除該波長中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測光路中的空白溶液換成標樣,點擊“標樣測量”讀取標樣的吸光度值。
6.所有標樣測量完畢后,將光路中的標樣換成待測樣品,點擊“樣品測量”進行樣品測量。
7.點擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測量結(jié)果。
五、核酸測量
1.點擊左側(cè)主功能欄中的“核酸測量”即可進入核酸測量界面。
2.根據(jù)實驗要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測光路同時放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點擊“空白”,以扣除該波長中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測光路中的空白溶液換成待測樣品,點擊“測量”得到230nm、260nm、280nm和320的吸光度值同時計算出A260/A280、A260/A230和樣品濃度。
6.點擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測量結(jié)果。
六、蛋白質(zhì)測量
1.點擊左側(cè)主功能欄中的“蛋白質(zhì)測量”即可進入蛋白質(zhì)測量界面。
2.根據(jù)實驗要求,在“設(shè)置”設(shè)定檢測參數(shù)。
3.在樣品室內(nèi)參比及檢測光路同時放入裝有空白溶液的比色皿。
4.點擊“空白”,以扣除該波長中空白溶液的背景吸收。
5.將檢測光路中的空白溶液換成待測樣品,點擊“測量”,儀器會按照設(shè)定好的計算方式和濃度計算方法計算出濃度。
6.樣品測量完畢后,點擊“結(jié)束”生成結(jié)果文件。
7.點擊“保存”并選擇保存路徑即可保存測量結(jié)果。